大鼠分泌型免疫球蛋白A sIgA检测试剂盒
说明书Elisa检测试剂盒专业售后服务提供代测:
规格:96T/48T
试剂盒说明书:48孔配置一份/96孔配置一份
种属:人、大鼠、小鼠、兔、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等,多年专业酶免服务,质量保证,提供代测服务
大鼠分泌型免疫球蛋白A sIgA检测试剂盒 Elisa试剂盒实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗LEP抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗LEP抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的LEP呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
该ELISA试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
大鼠分泌型免疫球蛋白A sIgA检测试剂盒 包装规格:
48孔配置 | 96孔配置 | 保存 | |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃低温保存 |
标准品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
浓缩洗涤液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃低温保存 |
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细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。