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产品名称 |
iMedCellTM 人类心肌细胞分离试剂盒 |
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货 号 |
ME-1002016 |
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规 格 |
1kit |
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保存条件 |
详见产品内容 |
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使用范围 |
人类原代心肌细胞分离和培养 |
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保 质期 |
6个月 |
产品简介
人类心肌细胞分离试剂盒，ME-1002016是埃德斯生物科技有限公司（iMedCellTM）开发的一款用于人类心脏原代心肌细胞分离和培养的试剂盒。经过该方法分离心肌细胞会保持成熟心肌细胞状态，有明显肌节结构，且具有自动收缩性，可用于细胞增殖及离子通道检测。
产品特性
l 缓冲液中添加心肌细胞保护剂，提高心肌细胞存活率，减少运输过程中心肌细胞损失。
l 使用基质胶作为心肌细胞附着载体，提高心肌细胞活性及贴壁效率。
l 保持完整人类心肌细胞形态及生理特性。
产品内容
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试剂 |
规格 |
数量 |
保存 |
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Transport solution |
250ml |
1瓶 |
2-8℃ |
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Wash buffer |
250ml |
1瓶 |
2-8℃ |
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Cell Dissociation SolutionⅠ |
50ml |
1瓶 |
-20℃分装保存 |
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Cell Dissociation SolutionⅡ |
100ml |
1瓶 |
-20℃分装保存 |
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Mouse Cardiomyocytes Culture Medium |
100ml |
1瓶 |
2-8℃ |
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Ready-to-use Gelatin |
50ml |
1瓶 |
2-8℃ |
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操作方法
1、 组织储存运输
保留手术后切除的小块心房样本，预冷心肌细胞分离缓冲液，缓冲液包括葡萄糖，氯化钾，硫酸镁，氯化钠，磷酸氢二钠。在运输组织前，在缓冲液中加入少量心肌细胞跳动抑制剂，起到保护心肌细胞的作用。
2、 组织样本剪碎
一般在上述缓冲液中，心肌细胞可以保存5-6个小时，到实验室后，在心肌细胞分离缓冲液中，将样本剪成小块。
3、 组织清洗
在37℃预热心肌细胞分离缓冲液，并清洗样本2-3次
4、 去除非心肌细胞
预热protease酶，消化5-8分钟1次，去上清，去除血细胞，内皮细胞等。
5、分离心肌细胞
使用Ⅰ型胶原酶，消化心肌细胞。37℃，摇床消化3-5次，每次5min.
6、心肌细胞收集
在本研究中使用基质胶作为心肌细胞附着材料，提前2小时37℃基质胶包被培养板。
7、心肌细胞培养
在本研究中使用无血清心肌细胞培养基，使用基础培养基IMDM+B27作为心肌细胞无血清培养基。
8、心肌细胞鉴定观察
通过细胞形态鉴定以及免疫荧光染色方法，鉴定心肌细胞。