A-673 A-673人横纹肌肉瘤细胞
2019-10-25 14:27  点击:203
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A-673人横纹肌肉瘤细胞冻存时使用的DMEM培养基,复苏时使用MEM培养基,第二天发现复苏不成功,细胞没有贴壁,我又重新离心之后加入DMEM培养基,请问大神对细胞有影响吗??之后是否可以贴壁生长?

资源名称 A-673
种属 人横纹肌肉瘤细胞
类型 组织:肌肉 疾病:横纹肌肉瘤
形态 多边形
培养方法
培养基 DMEM培养基(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;优质胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。

这两个培养基成分差距不大,大部分细胞换用应该没什么影响。A-673人横纹肌肉瘤细胞复苏不贴壁的话可能是:1.冻存细胞有问题,比如冻存细胞状态不是很好,冻存降温过快等;2.复苏细胞有问题,比如融化速度过慢,离心时间和转速有问题;3.细胞本身特性,有些细胞贴壁很慢,过夜不一定会都贴壁,这种情况不动是的,再离心的话细胞贴壁只会更慢。

A-673人横纹肌肉瘤细胞爬片的步骤:

1 什么是细胞爬片?其用途是什么?

2 细胞爬片的步骤是怎样的?

3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器?

细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁A-673人横纹肌肉瘤细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上,细胞贴得更牢固。

细胞爬片:将片子放在细胞培养板(均已经消毒)中,加入一定数量的细胞悬液,让它生长24小时。待它贴壁后,细胞爬片就制作好了。

需要的器材:多聚赖安酸、合适大小的盖玻片(根据细胞培养板孔大小而定)、细胞培养板、培养基。

 

THP-1(人单核细胞白血病) 5×10?cells/T25培养瓶
A549(人非小细胞肺癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
TF-1(人血液白血病细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
TE-1(人食管癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
Tca-8113(人舌鳞癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
A-431(人表皮癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
A-375(人恶性黑色素瘤细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
T84(人结肠腺癌肺转移细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
A2780(人卵巢癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
A172(人胶质母细胞瘤细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
T-47D(人乳腺管癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
95-D(人高转移肺癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
T24(人膀胱移行细胞癌细胞) 5×10?cells/T25培养



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