Rnasin( 核糖核酸酶抑制剂RNA酶抑制剂)
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RNA酶抑制剂概述
RNasin 是从人胎盘中提取的特异性RNA酶抑制剂，分子量为 51,000 道尔顿的蛋白质，等电点 pH 值为 4.7 。它能特异地与 RNase 以 300 的抑制常数 (ki) 以非共价键结合形成复合体而使 RNase 失去活性。在缓冲液为 0 -0.5M NaCl ， pH5-8 的条件下保持其活性， pH7.8 时活性zui高。经严格质量检验，该产品为电泳纯，无 RNase 、 Nickase 污染，比活为 100,000 单位 / 毫克蛋白，达到标准。
RNA酶抑制剂特性
1. 抑制一般的真核 RNase 包括 RNaseA 、 B 、 C 和人胎盘 RNase ；
2. 不抑制 RNase H ， S1 核酸酶， SP6 ， T7 和 T3 RNA 聚合酶， AMV 或 M-MLV 反转录
酶， Taq DNA 聚合酶， RNase T1 ；
3. 活性 pH 范围宽广，但需要 1mM DTT 以保持其活性。
RNA酶抑制剂应用
1. 用在有潜在 RNase 污染的地方。
2. 在 cDNA 合成中保护 mRNA 。
3. 体外转录系统、翻译系统，保护 mRNA 。
4. 用于多核糖体的活性、产量增加。
5. 增进体外病毒复制。
6. 促进同源体系中的 RNA 翻译。
7. 制备无 RNase 的抗体。
8. 提高 Riboprobe (R) 系统 RNA 合成反应的得率。
浓度 20-40u/ul 。
RNA酶抑制剂单位定义
抑制 5ng RNase A 活性的 50 ％所需酶量为一单位。
储藏缓冲液
20mM HEPES-KOH pH7.6, 50mM KCl, 8mM DTT, 50% 甘油。
RNA酶抑制剂对核酸酶的选择性抑制
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抑制 |
不抑制 |
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RNase A |
RNase T1 |
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RNase B |
S1 核酸酶 |
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RNase C |
从曲霉属中提出的 Rnase |
RNA酶抑制剂的性质
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活性 |
通过与酶分子非共价结合抑制 RNase 活性 |
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抑制类型 |
竞争性抑制 |
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结合常数 |
Ki=4.4×1014 |
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与 RNaseA 结合比例 |
1:1 |
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分子量 |
51,000 道尔顿 |
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等电点 |
pH4.7 |
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自由巯基 |
30 |
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pH 的适应范围 |
pH5-8( 在 pH7-8 具有zui高活性 ) |