需要而未提供的试剂和器材

1.   酶标仪(450nm检测波长滤光片，570nm或630nm校正波长滤光片) 。

2.   洗板机（可调注液量，保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。

3.   超净工作台，生物安全柜，通风柜。

4.   单道加液器（量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5.   多道加液器（8道或12道，量程为50-300μl).

6.   37℃恒温箱。

7.   低温离心机。人钙联蛋白ELISA试剂盒

8.   电冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.人钙联蛋白ELISA试剂盒

9.漩涡混合仪，低频振荡器等

注意事项

1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

3． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

4． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

6. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸，使用时必须注意安全。

7. 各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

8. 每次试验测定的同时做标准曲线，。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n）。

9. 配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀。

10. 实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热。

11. 手工洗板应注意：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

样本要求人钙联蛋白ELISA试剂盒

1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存或根据存放，时间做相应温度调整，但应避免反复冻融，（由于样本种类过多，每个单位处理方式不一样，本说明书不做详细介绍）。