RFT028 高纯度质粒提取试剂盒
2023-04-19 17:09  点击:276
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品牌:2094
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特别提示:包括高纯度质粒提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:高纯度质粒提取试剂盒
英文名称:High purity Plasmid Extraction Kit
产品货号:RFT028
产品规格:100次|200次

本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性,可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而,对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素),此试剂盒不能达到要求。另外,尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb),但我们不推荐使用。如果一定要使用,请参考以下方法:加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物),同时按照比例增加P1、P2、P3的用量;洗脱缓冲液应在70℃预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率,其它步骤相同。

本试剂盒使用了有颜裂解液,菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验,所以我们增加了有颜裂解液(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后,有颜裂解液使菌液变为浑浊的红色;加入P2后,有颜裂解液立即使溶液变为澄清的红色,裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清,如果红色非常均一,表明裂解充分;在完全裂解的体系中加入P3混匀后,体系立即变为黄色,任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。

本试剂盒增加了去蛋白液PD,能更加彻底地去除蛋白污染,得到纯度更高的质粒。

试剂盒组份:
试剂盒组成 100次 200次 贮存方式
RNase A 300μl 600μl -20℃
有颜裂解液 600μl 2×600μl 室温
溶液P1 30 ml 60 ml 室温(加入RNase A后2-8℃保存)
溶液P2 30 ml 60 ml 室温
溶液P3 40 ml 80 ml 室温
去蛋白液PD 60 ml 120 ml 室温
漂洗液PW 25 ml 2×25 ml 室温
洗脱缓冲液EB 15 ml 15 ml 室温
质粒吸附柱CP 100个 2×100个 室温
收集管(2 ml) 100个 2×100个 室温
说明书 1份 1份


储存条件:室温,有效期12个月。

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