品牌:1772
下列是产品的订购信息：
|
产品名称 |
小鼠脑静脉血管组织提取物 |
|
规格 |
详见说明书 |
|
货号 |
YS-X10591 |
脑组织是指包容在颅腔内的三大块神经纤维组织：大脑、脑干和小脑。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠脑静脉血管组织中高质量的总RNA，PCR准备的条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备小鼠脑静脉血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
潜在的应用： 已知基因的PCR克隆；mRNA选择性剪接；基因克隆与目标测序；Western and Northern Blot；蛋白检测与蛋白质组学；芯片研究与表达图谱
小鼠脑静脉血管组织提取物细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
小鼠脑静脉血管组织提取物细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
血管性血友病因子（VWF)2-8℃for6months氯霉素Elisa检测试剂盒
人T淋巴细胞SandwichELISA,DoubleAntibody血管性血友病因子（VWF)2-8℃for6months氯霉素Elisa检测试剂盒
人T淋巴细胞 5-甲基苯并噁唑啉
抗凝血酶受体(ATR)2-8℃for6months磺胺二甲嘧啶Elisa检测试剂盒
人膀胱平滑肌细胞，HBSMCGD细胞SandwichELISA,DoubleAntibody抗凝血酶受体(ATR)2-8℃for6months磺胺二甲嘧啶Elisa检测试剂盒
凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）2-8℃for6months恩诺沙星Elisa检测试剂盒
人膀胱成纤维细胞SandwichELISA,DoubleAntibody凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）2-8℃for6months恩诺沙星Elisa检测试剂盒
人膀胱成纤维细胞 3-氯-2-肼基砒啶
人膀胱平滑肌细胞，HBSMCGD细胞 ICG-001
小鼠脑静脉血管组织提取物液体硫乙醇酸盐培养基颗粒me
硫乙醇酸盐流体培养基颗粒DL-PhenylalanineDL-苯丙氨酸Homosapiens(Human)
改良马丁培养基颗粒DL-PhenylalanineDL-苯丙氨酸Homosapiens(Human)
改良马丁琼脂培养基颗粒EosinY伊红Y(醇溶)Rattusnorvegicus(Rat)
玫瑰红钠琼脂培养基颗粒EosinY伊红Y(醇溶)Homosapiens(Human)
胰蛋白胨大豆肉汤颗粒SDS十二烷基硫酸钠SigmaRattusnorvegicus(Rat)
胰蛋白胨大豆琼脂颗粒SDS十二烷基硫酸钠SigmaMusmusculus(Mouse)
脑心浸出液肉汤（BHI）颗粒SDS十二烷基硫酸钠SigmaSusscrofa;Porcine(Pig)
麦康凯琼脂（药典）颗粒VerapamilHydrochloride维拉帕米盐酸盐Bostaurus;Bovine(Cattle)
大豆酪蛋白消化物培养基（USP）颗粒VerapamilHydrochloride维拉帕米盐酸盐Homosapiens(Human)
麦康凯肉汤USP颗粒2-Naphth2acetate乙酸－2－奈脂Susscrofa;Porcine(Pig)
胰酪胨大豆肉汤培养基（TSB）颗粒Imatinib伊马替尼Rattusnorvegicus(Rat)
10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤颗粒Rutinhydrate芸香叶苷（芦丁）Homosapiens(Human)
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。