1．STI501型高效液相色谱仪单泵操作规程

1.1 系统组成

本系统由1个P501溶剂输送泵、手动进样阀、UV501紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。

1.2 准备

1.2.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气30min。

1.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向）和定量环。

1.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

1.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

1.3 开机

接通电源，依次打开P501输液泵、UV501紫外检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。

1.4 更换流动相并排气泡

1.4.1将管路的不锈钢过滤头放入装有准备好的流动相的储液瓶中；

1.4.2 逆时针转动泵的排空阀，拧松排液阀；

1.4.3 按输送泵的[purge]键，绿色指示灯亮，泵以10.0ml/min的流速冲洗，2min后停止；

1.4.4 将排空阀顺时针旋转到底，关闭排空阀。

1.4.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。

1.4.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[run]键，冲洗3min后再按[stop]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值

1.5 参数设定

1.5.1 波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[λ]键，用数字键输入所需波长值，按[Enter]键确认。

1.5.2 流速设定：在输送泵显示初始屏幕时，按[flow]键，用数字键输入所需的流速（一般都是1ml/min），按[Enter]键确认。


1.6 平衡系统

1.6.1 按《N2000色谱数据工作站操作规程》打开“在线色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下“数据收集”页的[查看基线] 按钮。

1.6.2洗脱方式

1.6.2.1 按泵的[run]键，绿色指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相，具体以在线工作站中基线稳定为准。

1.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。

1.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过50Psi。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按1.4.6操作。

1.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

1.7 进样

1.7.1 进样前按检测器[A/Z]键调零，查看软件中信号值是不是在0mv，如果变差较多，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点。

1.7.2 用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量（一般为进样阀定量环的3~5倍体积），将手动进样阀拨杆拨至Load位置，将试样溶液注入进样阀，将进样阀拨杆拨至Inject位置，完成进样，在线工作站自动采集数据。

1.7.3  数据采集操作。

1.8．实验结束工作

1.8.1实验结束后，关闭N2000工作站及UV501检测器。

1.8.2系统冲洗。若实验分析时，流动相系统中含有缓冲盐类物质，需要先用10%甲醇水溶液，1.0ml/min冲洗40分钟后，再更换纯甲醇试剂，1.0ml/min冲洗40分钟，即可按[stop]键停泵，然后关机。若流动相中无缓冲盐，则可直接用纯甲醇试剂冲洗系统，关机即可。

5.3 系统若长期不用时，需用纯甲醇冲洗整个HPLC系统，以保证系统里始终充满溶剂。