STI 501液相色谱仪操作过程指南

1.                 开机：依次打开泵，检测器和电脑的电源。STI501泵和检测器的电源开关在仪器的背面，电源线接头的旁边。（打开电源要果断，一次到位。防止高频率的反复开关电源，这样会造成仪器主板的损坏。）

2.                 确认色谱柱是否适合分析当前的样品。国标，行业标准和其他文献提供的分析方法上都会标注使用什么样的色谱柱。常用色谱柱有C18，C8，氨基柱，硅胶柱，氰基柱等等。（色谱柱是有方向的，更换柱子时要注意液体的流向应跟柱子标签上箭头的指向一致。更换柱子时要注意拧好接头，以防止漏液和尽量减小接头产生的死体积。)

3.                 将流动相换成分析当前样品所需的流动相。更换流动相时先将不锈钢滤头用新的流动相淋洗一下，然后将滤头放到装有新流动相的瓶子里，用手捏住溶剂管，轻轻的抖动滤头，以赶走滤头里的部分气泡。接下来打开泵的排空阀，用新流动相冲洗两分钟左右。(更换流动相时要特别注意：当前后两种流动相是互不相溶的流动相时，需要用一种中间流动相过渡。当流速是1.0ml/min时，该过程至少是30min。例如，当流动相由甲醇换成带有磷酸盐的溶液时，需要用10%的甲醇水溶液过渡，反之亦然。)

4.                 启动泵。(1)排空。步骤：打开排空阀（将排空阀逆时针旋转180度），确认排空废液管出口在废液瓶里，按下排空按钮（“Purge”键）。在泵的进液管和排空管看不到气泡的情况下，延续2min后停止排空, 按“Purge”键，泵停止运行后关紧排空阀。（注意：当进液管里面没有任何液体时，需用洗耳球或者大针筒将液体吸入泵头后，先1.0ml/min运行片刻，当有液体抽出后，再进行排空操作，这样可延长泵头密封圈和柱塞杆的使用寿命。）(2)设定流速。步骤：按下“func”键，当光标在流速处闪烁时，按数字键输入所需的流速，通常按数字键“1”。在显示屏显示的流速为设定的流速时，按“Enter”确认流速的输入，然后按“pump”启动泵，此时运行灯亮，泵压会逐渐上升。当泵压稳定（压力波动不超过50psi），检测器废液管有废液流出时，可认为泵运行正常, 泵启动完成。

5.                 设定波长。按检测器的“λ”，当光标在显示屏的波长处闪烁时，按数字键输入想要的波长，当显示屏上的波长显示正确后，按“Enter”确认波长的输入, 按“Ce”返回主界面

6.                 观察基线。（1）点电脑桌面上的“online.exe/N2000在线工作站”，选择通道1，点“数据采集”，点“查看基线”，观察基线是否水平。

（2）编辑实验信息。在系统平衡基线的同时，可点击“实验信息”。在“实验信息”页面，可在“实验标题”，“实验人姓名”，“实验单位”，“实验简介”栏填充相应的内容，这样会使N2000生成的报告信息完整，规范。

（3）编辑方法。在系统平衡基线的同时，进行方法的编辑。点“方法”。进入方法编辑见面。在“采样控制”界面（即点击“方法”进入的第一个界面）设置“采样结束时间”；勾选“采样结束自动积分”；选择“文件保存方式”（对于初学者建议使用手动保存方式），确定文件保存路径，然后点“采用”。对于“方法”选项的其他内容，可暂不理会，保持默认设置不变就可以了。

7. 进样。（1）进样前先用流动相清洗进样阀，清洗液体积在1ml以上。（2）进样前用流动相洗针至少六次以上，然后再用样品洗针三次以上。（3）切记在“Load”位置推进样针的活塞，然后将进样阀手柄转动到“Inject”位置。要注意不要将气泡推入进样阀。为确保有较好的重现性，要求进样体积是定量环体积的3倍以上。为了便于以后比较谱图，通常在推活塞之前按一下检测器上的调零按钮“A/Z”。（4）采样过程中，点击“预览”，可实时查看峰处理结果。采样接束后可在离线工作站“offline.exe”中打开谱图，在进行相关处理后，点击“预览”可查看处理结果，点击“打印”可将处理结果转换成纸质报告。

8.         结束实验。结束实验时将流动相换成色谱甲醇，以1.0ml/min,流速冲洗系统至少30min（其操作与上述3中流动相的更换相同）。冲洗完成后关掉电源，顺序是先检测器后泵。