梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。

原理： 流动相由几种不同极性的溶剂组成，通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子k，并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离

特点：提高柱效改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k'值和最后一个峰的k'值相差几十倍至几百倍时，使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定，须使用恒流泵，否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。

优点：1.缩短分析周期；2.提高分离能力；3.峰型得到改善，检少拖尾；4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。梯度洗脱适合分析组分复杂且用不易分离的组分。

B. 梯度系统

一．对系统的认识：

1. 系统构成：LC-10Tvp等度系统由LC-10Tvp高压恒流泵，高压静态混合器，SPD-10Tvp紫外检测器，进样阀，色谱柱，survey工作站六个主要单元组成。

2. 各单元的功能：

LC-10Tvp高压恒流泵：为系统提供流量恒定，高压的流动相。流量恒定是系统稳定的必要条件，高压主要是提高分离的效率，可极大的缩短实验时间。

高压静态混合器：使不同流动相均匀，快速的混合，同时尽量减少溶解热，混合脉动和系统死体积。

SPD-10Tvp紫外检测器：根据化合物对光的吸收规律，将光的变化转化为电信号，进而转化为数字信号或模拟信号。

进样阀：待检测样品由进样阀加载到系统中。

色谱柱：提供分离混合物所需的固定相。混合物流经色谱柱时，与流动相，色谱柱里填充的固定相发生系列的物理作用，由于各组分在色谱柱里面的迁移速率不同，这样当它们流出色谱柱时，各组分得到分离。

survey工作站：采集检测器生成的信号，将信号转化成数据谱图，根据需求对信号进行不同的处理。

3．系统运转的基本流程：由泵输出的高压，速度恒定的流动相，将进样阀样品定量环中的样品，携带到色谱柱，在色谱柱里面得到分离，分离后的组分经过检测器流通池时，检测器产生可供分析的信号传输到工作站，工作站依托电脑进行系列的数据处理，完成基本的定量和定性任务，以及检测所需的其他任务。